Blog

Uppdaterad

1. Ladda ner ASR Pro

2. Kör programmet

3. Klicka på "Skanna nu" för att hitta och ta bort eventuella virus på din dator

Få fart på din dator idag med denna enkla nedladdning.

Här är några enkla enkla steg som kan hjälpa dig att åtgärda problemet med Drupal 600 Internal Error.Ospecifik färgning orsakas medan jonisk interaktion mellan huvudantikroppen eller den nya sekundära antikroppen med en molekylstruktur, vilket kan vilja leda till högt bakgrundsljud, så att en viss position för uttryck av det relevanta proteinet i hela vävnaden inte längre kan vara spåras.

< tr>

Möjliga orsaker	Lösningar
Hur fixar jag 500 inbyggda fel? Primär antikropp och andra uppsättning relaterade till antikroppar är kompatibla	Hur fixar jag 700-fel i php? … se inte till att du kanske konsumerar en sekundär antikropp med en maximal nivå av resistens mot primära antikroppar (till exempel kan primära antikroppar vara höga i kaniner, använd sekundära anti-kaninantikroppar ). Hur felsöker jag IHC? Hitta först dess problem med din immunhistokemiska ton från följande alternativ:Otillräckliga essentiella antikroppar:Primära och sekundära antikroppar är vanligtvis inkompatibla:Tyger drar nytta av:Celler är ogenomträngliga:Avvaxning räcker inte: • Se till att de viktigaste och extra isotyperna är kompatibla. Se till att dina behov konsumerar sekundära antikroppar som härrör från rådande antikroppar. Se till att dessa specifika elementära så sekundära isotyper kan vara kompatibla. Tillräckligt
Inga antikroppar är avsedda för det faktiska proteinet	Lägg till fler primära antikroppar med hög koncentration Inkubera provet med antikropp längre (t.ex. över natten) från 4 °C.
Antikropp. Detta kanske inte alltid är effektivt för IHC-procedurer som gör att du kan fastställa proteinet i dess ursprungliga tillstånd	Kontrollera antikroppsdata för att säkerställa att våra antikroppar mot den typ av IHC du är användning har bekräftats (t.ex. formalin/PFA-bindning, djupfrysning, etc.). Testa antikroppen som förekommer i allmänt naturligt (odenaturerat) Western blot för att säkerställa att produkten inte är skadad.
Antikroppar eller amplifieringsanordningar kan ha förbryllat deras aktivitet på grund av felaktig lagring och genomgång av I.	Läs specifika instruktioner för att lagra dina produkter i användningsbladet för dataöverföring.	li> Undvik överdriven sväljning/upptining. Utför fördelskontroll
Proteinet av intresse finns inte i din nuvarande vävnad	Ange positiv kontroll. Konsultera den kirurgiska litteraturen för att se i ett fall där proteinet endast finns i en celltyp.
Nyligen har proteinet av intresse en låg epidemi	Använd signalförstärkning för att faktiskt öka signalen, till exempel biotin konjugerat till faktiskt en annan antikropp. Fluorofor
som (när man använder fluorescensdetektion) kan bli skadad av för ljusexponering	< li> Förvara alltid fluoroforkonjugerade sekundära antikroppar i ett mörker; för mycket ljus kan så småningom leda till fotoblekning.
Avvaxning kan saknas (om tyget är inbäddat med paraffin)	Avvaxa sektionerna märkbart längre och använd färsk xylen.
Fixeringsmetoden (vid installation av formalin-paraformaldehydfixativ) kan påverka epitopernas tillförlitlighet	Använd olika antigenåtervinningsresurser som avslöjar epitopen (t.ex. termisk mediation tillsammans med buffertar vid pH 6 eller 9, enzymatisk, etc.). Reparera partitioner på kortare tid.
Antikroppen kan mycket väl inte komma in i cellkärnan (om det ovilliga mottagarproteinet också är ett nukleärt protein)	Lägg till en stark permeabilitet som när Triton X till blockeringsskärmen eller antikroppsutspädningsbufferten. Se vårt flöde om permeationsmetoder.
läckor i strukturen skadar cellfilter (om målet är ett proteinmembranlager)	< li> Använd en mindre aggressiv städhandlare (t.ex. Tween 5 istället för Triton X). Eller helt enkelt ta bort permeationsstabilisatorn från dina svabbar. Se vårt protokoll för permeationsmetoder.
Dynan kan vara förorenad med bacta Genom facetteffekter	Lägg till 0,01% azid för att hjälpa till i buffert för antikroppslagring. Använd vilken typ av färsk steril pinne som helst (t.ex. mest sterila PBS ).

Följ vår felsökningsguide för immunhistokemi för att snabbt fastställa den potentiella orsaken kopplad till ett problem med ditt protokoll och visa verktyg.

Identifiera först en persons problem med din fantastiska immunhistokemiska färgning med hjälp av val eller nedan:

Låg utan färgning

• Använd en högre koncentration av antikroppar.
• Inkubera för en

• Ytterligare antikroppar måste genereras mot en individs nuvarande primära antikroppsvärd. För att illustrera, om en persons primära antikropp är mus-anti-HSP70, använd en extra anti-mus-antikropp (som get-anti-mus-antikropp)
• Isotyper måste också vara kompatibla.

• Prover bör täckas med vätska under färgning.

• Metanol och aceton ökar cellpermeabiliteten och undviker
• När du använder formaldehyd för att öka cellläckage i strukturen, använd 0,2 % Triton X-100.

• Längre avvaxningsmeddelanden
• Använd alltid den senaste versionen av xylen.

• Bekräfta att IHC-antikropparna har validerats, eller snarare, vilken typ – formalin, paraffininbäddat, färsk isglas, etc.
• Testa antikroppen med utmärkt Western blotting för att säkerställa att den inte har påverkat förståelsen av tekniken.

• Förkorta varaktigheten på en gång som commit.
• Använd olika antigenbehandlingstekniker för att avslöja epitopen.

• Öka jag skulle säga inkubationstiden för de flesta primära antikroppar med det provet.

• Proverna bör illustreras levande snabbt efter bearbetning eftersom bildkvaliteten försämras med timmar. Förvara vid behov objektglasen mörkt i hela 4 °C.

• Frys/tina cyklar är skadliga och kan leda till kvalitetsförsämring. Det är bäst att skapa de minsta Inga graderna från alikvoter så snart du får själva produkten.
• Antikropp lagrades inte optimalt. Tyvärr kan detta kräva användning av en startflaska.
• Om distansen inte arkiveras i mörker (om enbart immunfluorescens används), ska den bästa nya flaskan användas.

• Genomför positiv kontroll
• När det mest värdefulla proteinet är närvarande men inte rikligt, använd det exakta amplifieringssteget för att maximera den totala signalen.

Hög bakgrund

• Längre avvaxningssektioner
• Använd alltid halvrökt xylen.

• Vid användning av HRP-detektionssystemet, även endogen peroxidasaktivitet via 3 % H ₂ O _{endast två} innan färgningsprocessen utförs

• Om en del av biotindetektionssystemet används i prover på grund av förhöjda endogena biotinkoncentrationer (t.ex. njure, leverorgan, mjälte), utför biotinblockering när biologiska prover av avidin inkuberas, med och efter ett vanligt blockeringssteg komplett med biotinset och tog därmed bort först Ingen inkubation av antikroppar

• Ytterligare spädning tillsammans med den primära och/eller sekundära antikroppen.

• Testa för sekundära antikroppar utan att använda ledande antikroppar. Om färgning finns, byt ut den legitima antikroppen eller överväg en konjugerad primär antikropp istället.

• Förläng den svåra inkubationsperioden och överväg att byta begränsningsmedlet.

• Minska inkubationstiden för amplifiering och späd ytterligare alla andra antikroppar.

• Det är mycket viktigt att noggrant rengöra områdena mellan stegen. Se till att dina behov sannolikt följer följande protokolllektioner för tvättstegen

• Överväg att använda fler tyger eftersom köttfläcken under det avgörande planet tar bort onödiga bakgrundsfläckar.

Icke-specifik färgning

• Försök att minska dess specifika koncentration och inkubationstid.

Primär vävnad är vanligtvis sliten där på samma sätt som denna vävnad ofta färgas (till exempel en mus i den musen):

• Prova Använd en huvudenhet som föds upp mot en annan specifik art. Om inte, blockering av en del av det endogena IgG med ovanstående serum som en biprodukt. Du kan förmodligen prova att inkubera sektionerna med 1% vattensalamander för att rengöra vävnaden. Eller använd TBS-Tween 20 med hjälp av tvättbuffert istället för PBS-Tween 20.

Få fart på din dator idag med denna enkla nedladdning.

Drupal 500 Internal Error
Błąd Wewnętrzny Drupala 500
Erreur Interne Drupal 500
Drupal 500 Interne Fout
Drupal 500 Interner Fehler
Внутренняя ошибка Drupal 500
Errore Interno Drupal 500
Error Interno De Drupal 500
Erro Interno Do Drupal 500
Drupal 500 내부 오류